基因芯片技术及其在耳聋研究中的应用

综述ｉｅｅＳｉｎｉｃｏｒａｏ　ｒ　ｎ　ｐｅｈＲｈｂｔｔｆ　ＨｅｎｏＣｈｎｓ　ｃｅｔｉＪｕｎｌｆａｉｇａｄＳｅｃ　ｅａ…ａｉｎｏ：．９９．ｎ１７—９３２０．６０７１ｓｄｉ０３６￣ｉｓ．６２４３．０９０．０基因芯片技术及其在耳聋研究中的应用　ｃｈｉ　ｄｉＴｈｅＤＮＡｓｐａｎ　ｔａｐｐｌａｔ　ｏｔ　ｔｉｉｃｏｎｔ　ｈｅｓｕｄｙｏｆｈｉｎｇｌ　　ｅａｒ　ｏｓｓ　■赵建东戴朴　韩东一ＨＪａ－ｄｎＺＡ０　／ｎｏｇ，ＤＡ／Ｐｕ，ＨＤｎ－ｙＡＮ　ｏＥ／【Ｒ６．３【Ｂ【１７—４３（０９０—０３—４中图分类号］７４４文献标识码】文章编号】６２９３２０）６０００　基因芯片又称ＤＮＡ芯片（　　　ｃ　Ｐ）、ＤＮＡｈ　ｉ　　测效率低等问题。ＤＮＡ微阵列（ｃＯｒ　　ｒ　ａ，ＤＮＡｍｉ　ａ　Ｙ）寡核苷酸阵列ｒ②低成本对大规模基因进行检测．其是基尤采不且　（　ｇｎｃｅｔｄ　ａｒｙ等。因芯片技术是融微　因筛查时．用传统方法．仅费时，成本较高，ＪＯｊｏｕＩｏｊｅｒａ）基　电子学、物学、理学、学、算机科学等多学　而采用基因芯片则可有效降低检测成本。生物化计它科为一体的新技术。可以将生物中许多不连续③高度自动化和微型化基因芯片技术由于激阅的分析过程．植到固相的介质芯片，使其连续　采用了电脑机械手、光共焦扫描仪、读仪以及移并使化和微型化。着基因芯片技术的逐渐成熟．因　电脑图像处理等技术，得检测过程高度自动化随基芯片已逐步从实验室走向工业化　在生物医学领　和微型化　节约了大量人力并减少了人为因素所域获得了广泛应用。　　导致的检测误差。１基因芯片技术概况　１３基因芯片技术在耳聋研究中的应用　１１基因芯片的基本原理及分类其耳聋作为一种病理现象，发生与基因的表基因芯片将许多特定的寡核苷酸片段或基因　达密切相关　且耳聋基因的表达在不同细胞　不同如片段作为探针，一定顺序密集排列在固相载体　阶段亦是不同的　其表达复杂多变，果应用传统按有然工表面，形成致密、序的分子点阵，后用同位素　的方法对耳聋基因表达进行研究，作量是十分而高快或荧光物质标记的样品与探针按碱基配对原理进　巨大的：基因芯片则可以平行、效、速地进行杂交．过放射自显影或荧光共聚焦显微镜扫通从行基因表达差异的检测，而为基因功能的分析描，利用计算机系统对杂交信号进行检测、较．提供了一种新的技术手段。目前基因芯片在耳聋比　　从而迅速得出所检样品中分子的数量和序列信　中的应用主要体现在以下几个方面。息。因芯片的类型按不同的分类方法可分为不基２基因芯片在耳聋基因表达研究中的应用按同的类型。芯片的制备方法可分为原位合成法其耳蜗作为将声音转变为神经冲动的器官．和合成点样法。探针的种类可分为ｃＡ微阵列　功能的正常实现同耳蜗各部结构的正常发育和按ＤＮ　芯片和寡核苷酸微阵列芯片等。而形态密不可分，耳蜗特异性的基因表达对其发１　２基因芯片的特点及优势ｒＭＣｅｍｏｔ育和形态具有重要作用。Ｄ　ｔ…用寡核苷高①高通量．速度　７０３基因芯片技术同时将大量　酸芯片在斑马鱼内耳毛细胞中确认了１　个内所探针固定于支持物上，以可以一次性对样品大其耳毛细胞特异性表达的基因．编码的蛋白质的从突量序列进行检测和分析，而解决了传统杂交技　功能涉及到细胞的跨膜运输、触传递　转录控自操检术操作繁杂、动化程度低、作序列数量少、　制、胞粘附、号传导等多个方面。中选取了细信从ＥＳ和Ｆ　２７结ｓＡＨＯＲＥＩＴ１　两个基因进行功能研究．作者单位解放军总医院耳鼻咽喉一头颈外科果表明这两个基因对于动纤毛的发育和功能是０８３北京１０５同必不可少的。时他还确认了一个在毛细胞中表赵建东在职博士研究生主治医师作者简介：研究方　ＪＤＮＳ２。达的耳聋候选基因ＫＪ　２０耳蜗不仅具有相聋病分子诊断及耳鼻喉临床研究向：而对特异的基因表达，且其各部结构的基因表达戴通讯作者：ａｕ０＠ｒ　ｉ　ｏｐｐｎｎ朴ｄｉ３１ｉｓａｃｒ从亦是不同的．而使耳蜗复杂的生理功能得以实ｄ３１６　ｅ　韩东一ｈｙ０＠２３ｎｔ现。ＲｓＤＡ基因芯ＭＯＲＩ　用一种定制的小鼠内耳ｃＮＯ９期中国听力语言康复科学杂志２０第６ｎｅｓ　ｃｅｎｔｉＣｈｉｅＳｉｆｎａｌｆＨｅａｒｎｉｃＪｏｕｒｏ　ｉｑａｎｄＳｐｅｅｃｈＲｅｈａｂ＿ｔｉ　　Ｉｌａｔｏｎ综述ＣＥ）芯片（ＭＡ—Ｉ１来研究耳蜗内基因的差异表达。基中国人耳聋特点的基因芯片。因文库的构建可ＯＯ片上包含至少２Ｏ个内耳所特有的ｃ探　ＤＮＡｓ针，以使生物的遗传信息以稳定的重组体形式贮存起ｏｔｒ　Ｓ血比较内耳Ｃ　ｉ器、管纹和螺旋神经节中这些　来，对于分离克隆目的基因及复杂基因组作图且ＤＮ的结ＣＡＳ表达差异，果显示在每种组织中均有　具有重要作用，基因芯片是构建基因文库的一而一这ｅＰｒｅａ　描定数量的差异表达基因，些基因包括一些已　种重要技术。ｏｐｌＩ述了一种用基因芯片技还并知功能基因和假设基因，有许多未知基因。且　术来产生小鼠ＣＯｔ器的表达序列标签数据库的ｒ　Ｓ　ｉ　ｉｒ　Ｓ个在Ｃｏｔ器中发现了４与耳聋基因座有关的差　方法。取、析了２００独立的克隆　分成了提分００个ＯＴＯＴＯＴＭＰＳＳ。异表达基因：ＯＡ、ＯＲ、ＯＳ和ＴＲ３耳　８９个独特的基因簇，认了一组Ｃｏｔ器所特６０确ｒ　Ｓ　ｉ同蜗中基因表达的多样性充分说明听觉过程的产生　有的新基因。时还绘制了与人类遗传性聋具有听是数千个基因协同作用的结果。觉中枢能够根　共线性相关的小鼠Ｃｏｔ器序列表达标签。为ｒ　ｓ　ｉ这即据内外环境的变化而发生适应性变化．具有一　绘制Ｃｏｔ器中与听力有关的基因表达谱提供了　ｓｒｉ听另Ｂｉｌ＿ｓ，定的可塑性．觉中枢的可塑性和基因表达的变　新的视角。外，ｅ　ｅＬ构建了一个成年小鼠内Ｈｌ＿采３化有密切联系。ｏｔ　用基因芯片研究大鼠双侧　耳ｃＡ文库，此文库中从１９８独立克隆中ＤＮ在５　５个天２天耳聋后３、１下丘中神经传递相关基因的表达　获得了２５４序列，且通过比对人类和小鼠的２７个并来结确变化．研究下丘听觉神经的可塑性。果显示有　同源染色体．定了与耳聋基因座判别区域有关　Ｏ８　超过１０个基因具有差异表达，些基因有以前　的１１个基因簇。４　０这报道过的与耳聋有关的基因，编码钙结合蛋白如４基因芯片在老年性聋研究中的应用也如的基因，有尚未报道过的，编码网格蛋白的基是老年性聋又称年龄相关性听力下降，一种从　９天因等。中选出１个基因进一步研究在聋后３、对常见的交流障碍性疾病。老年性聋分子机制的天０结研ＡＢ　研究涉及到基因组学的各个方面。究表明在老２１和９天的基因表达变化，果显示编码ＧＡ—　、Ｄ。　的基因和编码离子型　年性聋的发病过程中，有很少一部分基因表达Ａ受体亚单位ｐ、Ｙ只ＡＡＭＰ　ｋｉａｅ的基　受基因型的影响．大部分基因的表达与年龄有谷氨酸受体亚单位ＡＭＰ　、、Ａ３ａｎｔ２而它　因在测试的所有时间内．们的表达均是增加的。关　。氨酸盐在听觉系统中是一种主要的兴奋谷而甘氨酸受体　亚单位的基因表达先是降低，然　性神经递质，氨酸盐和谷氨酸盐相关基因随年谷　后增高：１亚单位的基因表达在聋后２天时明显　龄而发生的变化．能在老年性聋的发病机制中可ａ。　１增高；亚单位的基因表达在３～２天内是增加　起重要作用。ａ　ＳｒＢＴｄＯ　研究了ＣＡ小鼠下丘中随年而０的，在聋后９天时则下降。５一羟色胺２Ｃ受体的　龄和听力变化而发生的谷氨酸盐相关基因表达Ｂ用ＣＲ８基因表达在所有时间内均是增加的　５一羟色胺５　变化。基因芯片和实时Ｐ技术研究了６个谷天２天受体的基因表达在３、１时是降低的．到了而其氨酸盐相关基因的表达。中有两个基因在两种０这ＰＣ基９天时则恢复到正常水平。些基因表达的变化　技术中均显示了一致性的改变：ＹＳ因随着年　说明下丘的听觉通路具有一定的可塑性。　　基Ｃａ龄而下调　Ｓｌ１３因随着年龄和听力损伤而上ＰＣ在３基因芯片在耳聋候选基因筛查和耳聋基因　调。ＹＳ谷氨酸盐转变为脯氨酸的过程中起重数据库建立中的应用它要作用，的缺失可以导致听觉中枢中谷氨酸盐从新生儿听力筛查的普及和有关听力基因的确　的增加和脯氨酸的减少．而导致谷氨酸盐的毒ＳＣ１基ａ定　促进了聋病分子诊断的发展。对引起耳聋基　性以及脯氨酸神经保护作用减弱。Ｉ　３因表针Ｇａｄｅｒｒ因的多样性以及耳聋遗传的异质性，　ｎ　开　达上调可能反映了针对谷氨酸盐毒性的细胞补偿９　个发了一种能够同时检测１８突变的基因芯片，　ｒＦｉｄｎ机制。　ｅｍａ　也通过芯片研究提示编码促代个这个芯片包含有８常见的耳聋致病基因（ＢＧＪ２的Ｒ基谢性谷氨酸受体７ＧＭ７因可能通过改变谷氨ＧＪＢ６　ＧＪＢ３　　ＧＪＡ１ＳＬＣ２６Ａ４　．ＳＬＣ２６Ａ５，　酸盐兴奋性中毒的敏感性导致老年性聋的发生。　　　ｒＮＡＲ１ＳＲ　ｔＮＡ—Ｓ　。测试，芯片对于新生２ｒｅ）经此ｈｉｔｎｅ…用组ＢＣｒｓｅｓｎ　基因芯片研究了４不同年龄ＣＡＡｑ４）发儿听力筛查后的随访、大儿童和成人耳聋基因　小鼠中水通道蛋白４的基因（Ｐ表达情况。较同耳ｐ检测是十分有效的，时也促进了耳聋患者医学　现随着年龄及听力的改变，蜗和下丘中Ａｑ４的国ｉ在ｐ的干预及遗传咨询的发展。内Ｌ等　也开发了针对　基因表达具有明显的改变．耳蜗中Ａｑ４表达７１中国听力语言康复科学杂志总第３期　３综述ｉｅｅＳｉｎｉｃｏｒａｏＣｈｎｓ　ｃｅｔｉＪｕｎｌｆａｉｇａｄＳｅｃ　ｅａｉａ１ｎｆｎｉｏｔ　Ｈｅｒ　ｎ　ｐｅｈＲｈｂＩｔ下调．在下丘中Ａｑ４表达先下调，后上调。而ｐ的然　而１　５Ｋ　４内．Ｘ３　Ｙ突变蛋白泡状分布于胞质内，３１Ｔ　这因此推测随着年龄的增加，ｐ表达改变可能会　突变蛋白则分布于核周。种异常的分布可能导Ａｑ４导致耳蜗毛细胞中离子梯度的改变，者影响下　致ＣＲ或从Ｌ因￣ＹＭＹＭ功能异常，而导致听力损失，ＩＣＲ丘中神经递质的循环，而导致老年性聋的发生。很可能是导致非综合征性感音神经性聋的基因之从　另外Ｔｄｏ【还研究了凋亡基因表达对于老年性ａ　ｓｒ～　ａ　　ＫＪ用Ｄｒ　ＬＡ３Ａｓｍｕａ　，ｃＮＡ芯片分析显示ＣＯ９基在　９５聋的致病机理。析了３１个凋亡相关基因．果　因在耳蜗中高度表达。１　个非综合征性感音分　８结发ＯＬＡ３有３个基因表达具有明显差异．此认为凋亡基　神经性聋患者中，现两个可能致病的Ｃ９基５因Ｇ１一Ｐ　　ｄＩ６　　说明Ｃ９可８８７因的表达变化可能在内耳老龄化过程中起重要作　因突变：　１１３ｅ和Ｄ１ＥＯＬＡ３用。　连能导致非综合征性耳聋。接蛋白在耳蜗功能中５基因芯片在噪声性聋研究中的应用连有重要作用，接蛋白基因突变可以导致一大部Ａｈｄ　６声创伤可以导致耳蜗炎症，症趋化因子与　分感音神经性聋。ｍａ　ｓ比较了耳蜗中１种炎用Ｄ种白细胞的募集反应与此有关。ｏｎｂｎ　用芯片　连接蛋白的表达水平，ＣＮＡ芯片确定了４主ｒＴ　ａｅｅ２ＣＸ９３和４。来研究噪声性损伤后耳蜗中趋化因子和粘附分子　要表达的连接蛋白ＣＸ６，２　ＣＸ０ＣＸ３其Ｎ２和Ｘ０推的ｍＲＡ表达的上调情况　结果显示单核细胞趋化　中两个连接蛋白Ｃｘ６Ｃ３都属于ｐ群，测它蛋白５（ＭＣＰ一５）ＭＣＰ、噬细胞炎性蛋白～１１、１巨　３　们异源性的分子构成的缝隙连接的生物物理学特此（Ｐ１ｐ）ＩＡＭ一１表达增加。创伤后这些　性在耳蜗离子的动态平衡方面起重要作用。外　Ｍｌ　和Ｃ的声　ｕ１　发ＡｍＤＮ突趋化因子和粘附分子表达的增加，明声创伤过　Ｌ６Ｖ垂ｑｅ．现线粒体ＤＮ（ｔＡ）变也可说在程中有多种基因参与其创伤修复过程。哺乳动　导致非综合征性耳聋。　物中．哚声导致永久性听力损失．之为永久强称７基因芯片在综合征性耳聋研究中的应用ｐ　ｎｎ　ｈｅｈＩ　ｓｌ　Ｔ．ｒｒｔ性阈移（ｅｍａｅｔｔ　ｓｏｄｈｆＰＳ）中等强尚综合征性耳聋是指除有遗传性聋外，伴有度的噪声导致暂时性阈移（ｅＰ　　　ｔ　ｓＯｄ其他组织器官的病变。目前有多种综合征伴有听ｒｒｒｔｍＯａＹｈｅｈＩｈｉｔＴＳ）Ｃｏ４ｓｆＴ，。ｈ”１比较了大鼠在噪声和非噪声条　力损害。ｈ　合征是以色素性视网膜炎、音ＵＳｅ综ｒ感件下的耳蜗ＲＴ噪　ＮＡ表达　发现ＰＳ声诱导许多即早　神经性聋伴或不伴前庭功能障碍为特征的疾病。如（—Ｆ基因的表达，编码转录因子的基因（ＣＯＳ，　个为目前已发现有８基因与该病有关。促进此病的ＧＲ１Ｅ　　７ＮＵＲ７／丁　和编码细胞因子的基因　Ｒ３）Ｃｒｅｒ在诊断，　ｍｅｓ开发了一种基因分型芯片。此Ｐ／ＢＧ２，ＬＦＩ１等。反ＴＳ声则下调　芯片上包含有２８与Ｕｈ　关的序列突变的等（Ｃ３ＴＯ）相Ｉ和ＰＴ哚９个ｒｓｅ有这用　个ｓｅ综７ｒ生长激素的基因。些研究为哚声刺激后耳蜗的　位基因特异性寡核苷酸。３０ｕｈ　合征的结分子反应提供了一个新的视角。Ｏｘ　用差异　病人来验证此芯片的有效性。果表明此芯片是Ｌｍａ”显示法和ＤＮＡ芯片法来研究鸡在噪声暴露后听觉～可ｓｅ种比较实用且经济的筛查工具，以用作Ｕｈｒ的可塑性。果显示在鸡的Ｃ　Ｉ器中ＵＥＢ因结ｒ　ＳｏｔＢ３基ＨＤ综合征是一种常染色体显综合征初筛的工具。Ｒ而本感在噪声损伤部位的表达立刻升高，在未损伤部　性遗传疾病，病以甲状旁腺功能减退、音神经表ｒｉ　ｓ位的表达则不升高，明Ｃｏｔ器对于哚声损伤一ａａ性聋和肾脏异常为特征。般认为转录因子Ｇｔ３　有一定程度的可塑性。Ａｉｉｒｋ　与本病的发生有关。　　用基因芯片来检测胚６基因芯片在非综合征性耳聋研究中的应用　天ａａ一　小胎第９５纯合子Ｇｔ３（／）鼠的基因表达来ａａ的结６个非综合征性耳聋即仅表现为单一感音神经性　情况，寻找Ｇｔ３靶基因。果发现２１基因不基聋．伴随其他组织器官的临床症状。因芯片技　下调，时发现其中一个下调的基因是肿瘤抑制同Ａｂ术在非综合征性耳聋研究中起重要作用。ｅａ２，腮基因Ｄｂ并且在胚胎中间区、弓和面一听神经用ｃＤＮＡ芯片分析人类耳蜗和前庭中的基因表Ｄｂ下ａａ这嵴等处，ａ２调和Ｇｔ３的表达有部分重叠。发ＣＲＭ只　达．现　晶体蛋白（Ｙ）在内耳中有表达。ｂ基ｔ３　是第一次发现Ｄａ２因与Ｇａａ突变的表型有关。　例９ＹＭ随后在１２非综合征性耳聋患者中寻找ＣＲ　Ｐｎ　ｄ合征是一种常染色体隐性遗传病。病ｒｅｄｅ综本在Ｘ３　５它的突变，羧基末端发现了两个突变：　１Ｙ和　以耳聋　前庭水管扩大和甲状腺肿为特征，是由　１Ｔ。３Ｌ６基这Ｋ　４突变后的蛋白与正常蛋白相比在细胞内　ＳＣ２Ａ４因突变所导致的，个基因编码～个正Ｊｂａ的分布明显不同．常蛋白一般均匀分布于胞质　阴离子交换蛋白。ａｂ　用芯片研究了血管纹中中。９期国听力语言康复科学杂志２Ｏ第６　ｅｎｉｉＣｈｉｓｅＳｃｉｔｆｃＪｏｕｒ—ｎｅ—ｎａｌ　ｏｆＨｅａｒｎｑａｎｄＳｐｅｅｃｈＲｅｈａｂ…ｔｔｏｎｉ　　ａｉ综述结　及１天未见到基因表达的变化。果是生后１０天　５【］ｇｄｉｅ—Ｐｒ　ＪＢｌｙ，ＩｅｔＭｅ　ａＧｎｔ８ｏｒｕｚａｉ，ａａ　Ｃｎｒｇｓｉ　ｓ＆　ｔｌｅｅｉｃ但并血管纹的变性，在断奶后发生了变性，且提示　ａａｓ　ｆｐｅｂｃｓ　ｙａｒｅｐｉｒｅｔｓｎ］ＡｎＣｎＬｂＳｉｙｓｎｌｉｏ　ｒｓｕｉｂ　ｒｙｄｒｅｘｅｉ［ｙｓａ　ｍ　ｎｏＪ　ｉ　　ｎｌａ　ｃ，巨４巨噬细胞可能与此有关。噬细胞标记包括ｃｄ５０８８：５～６２０　５５２５０．，Ｃｄ６８Ｃｄ８３ＬｙｚｓＬｇａＩ３ＭｓｒＣａｔ，，，ｓ，　２，ｈｅｐｓｉ　ＢＳｎｓ　、９ａｒ　Ｆ　ｏｚ［］ＴｄｓＳ，ＤＳｕａＭ，ＺｔｌＭ．ｅａ．Ｇｕａａｅｒｌｅｏ　ｅ　ｔａｅｔ　Ｌｔ１ｌｍｔ—ｅｔｄ和Ｋ及补体成分（ｒＣＣ４）达明显增加等Ｃ１．３、等表ｇｎｘｒｓｏ　ｃａｇｓｉ　ａｅｎｈｏｓｕｉｒ　ｍｄｒｉＪ　ｅｓｎ　ｗｈｅｅｐｅｉｈｎｅｔｇ　ｉｅｕｅｄｏｙｉａ［］　ｔ　ｍ　ａｔｂｎｒｉ　Ｂｓ０７．１　７：　９．Ｂａｎｅ．２０１　２１　这并且这种增加是血管纹所特有的。种现象说明１】ＦｉｍｎＢ，ａ　ｅ　Ｌｅ　ｕｎｍｎ．ｔ　Ｂ７　ｅ　Ｍ　ａ［０ｒｄａ　ＡＶｎａｒＬＨｅｔｌａＪｅｌＧＭ从巨噬细胞的浸润导致了血管纹的变性，而导致ａｉｔｎｒｓｐｉｉ　ｔｇ—ｒａｅａｉ　ｍａｍｎ［．Ｈｍａ　ｃｆ　ｓｃｂｔｌｌ　ｈｎｒＪｖｒｎｓｏｅｕｅｔｉｙｏａｅｅｔｄｅｒｇｉｐｉｅｔ］ｕｅｄｅ综　Ｐｎｒｄ合征的发生。ｌｎｔ　０９，１７５７６．ＭｏＧｅｅ，２０　８：８　９基耳综上所述，因芯片在耳聋基因筛查、聋基１］ｈｉｅｓ　Ｎ　ｏｚ　Ｍ，Ｚｕ×ｅ１Ａｅｒｌｅ　ｓｅ［１Ｃｒｔｎｎ，ＤＳｕａ　ａａｈ　ｔ．ｇ—ｅｔｄ耳因表达谱的绘制、聋基因组学以及各种耳聋疾ｅｒｇｏ：ｑａｏｉ　ｇｎ　ｅｐｅｓｎｈｎｅ　ｎｈ　ｍｏｓ　ｃｃｌｎｓｎｈａｉ　ｌｓａｕｐｒ　４ｅｅｘｒｓｉ　ｃａｇｓｉｔｅｏ　ｅｕｅｏｈａ尽病的研究中得到了广泛应用。管基因芯片还存ｎ　ｕｉｒｍｄａ［ｔｙＪｎ］ｒｎｇｓ２０，　３２－３．ｂｉ２ａｄａｄｏ　　ｒｉＪ．Ｂａ　ｅ，０９１５：７４　如制在一定的缺陷，芯片制作工艺复杂、作成本相［２ａｒ　Ｓ，ＤＳｕａ１】ＴｄｏＦ　ｏｚ　Ｍ，Ｚｕ，ａ．Ａｏｔｓ—ｒａｅ　ｓｈ　ｘ　１ｐｐｏｓｅｔｄｉｌ但基对较高，随着科学的发展，因芯片技术也将得ｅｅ　ｈｎｅｈｉｘｒｓｉ　ｉｇｎｓｃａｇ　ｔｅ　ｅｐｅｓｎｗｔ　ａｅｎ　ｈａｉ　ｌｓｎｔｅｍｕｅｒｏｎｓ　ｈｇ　ａｄｅｒｇｏ　ｉｈ　ｏｓ其到发展和完善，在耳聋研究中应用的领域也会　ｃｃｅ［Ａｏｔｉ０８Ｉ：６３　２ｉ］ｐｏｓｏｈａＪ５３ｐｓ，２０，　Ｉ０—１１并逐渐扩大，推动耳聋研究从基因诊断到基因功Ｉ】Ｔｒｂｎ　ＶＳｔ　［３ｏａｅｅＳ．ａｏＥ，ｈｍＬｔ１ｍｕｅｃｌｒｒｉｅｔｎａ　ａＩｌｃｔ　　ｐ　，ｅ．ｍｎ　ｅｅｕｍｎ从能及基因治疗等不断发展，而使耳聋研究进入　ｆｌｉ　ｃｕｉｔａｍ［．ｅｒｇｓ２０，２：１　１４．ｌｇｏｏｗｎａｏｓｃｒｕａＪＨａｅ，０６２２１５　ｔ］　　　２一个新的阶段。　收稿日期２０　０—１０９８０责任编辑李原参考文献１ｃｅｍｔ　Ｂ　Ｊ，ａｃｍＭ，ｕｓｔ　Ｊｎｌｉａｄｅｙｓ【］ＭＤｒｏｔＭｒＢｕｏ　ＪＨｄｐｈＡ．Ａａｓ　ｎｕｃｏａｖｌｔｎｆｅｈｉｅｒｓｉｏｅＪｉ　ｕｏ　ｔｒｌａｃｐ　］ｒ　Ｎｔｃｄｃ　ｆｎｔｎｌｅａａｉ　ｏｈ　ａ　ｃｌｔｎｒｔｍ［．ＰｏａＩＡａＳｉＵＡ．２０　１４：１２　１　２　ｃＳ０７　８０１　０８１５．２ｏｉｒ［］ＭｒｓＫＡ，Ｓｎｒ，ＰｏｅａＣ，ｔａ．ｉ　Ｅｍｐｉ　ｅ　１ｉｆｒｎｉ　ｘｒｓｉＤｆｅｅｔｌｅｐｅｓｎａｏｆｅｅ　ｗｉｉｔｅｏｈａａ　ｄｆｎｄｂ　ａｃｓｏ　ｍｕｅｉｅ　ｅｒｏ　ｇｎｓｈｅｅｔｎｈ　ｃｃｌ　ｓｅｉ　ｙ　ｕｔｍｎｏｓ　ｎｒａｉｏｒｙＪ　ｓｃｓｏａｙｇ１ｒｒ】ｍｃａａ［．ＪＡｓｏ　Ｂｅ　Ｏｔｌｒｎｏ．２００５　７—８９６：５　５ｏ　Ａｔｓｋ　Ｍ，ＬｍｘＡｅ　ａ．Ｄａｎｓｒｌｅ［】ＨｌＧ，Ａａｏ－ａｏａ　Ｃ，ｔ１ｅｆｅｓｅｔｄｌｓｉｔｎｈ　ｎｅｉ　ｏ　ｕｕ：ｅｅｘｐｅｓｎｒｆｉ　ｏｌｎｃｙ　ｏｉｐａｔｉ　ｉｔｅｉｆｒｒｃｌｃｌｓｇｎ　ｅｒｓｉ　ｐｏｉｇｆｌｗｉＪｏｌｎｏｇｅｏａｏ　ｅｐｅｌｃｉｔＪ．ＪＮｕｏｅ２０，　１６—１６　ｉｒ　ｖｙｃ５０ｒｍｖｌｆｐｒｈａａｔｉ［】　ｅｒｈｍ，０５９：０９　８．４ａｄｅ　Ｐｉａ　Ｅ，Ｍｓｅ　Ａ，ｅ　ａＳｕａｅｕｔ［］Ｇｒｎｒ，Ｏｍａｅｓｒｎ　ｍｔ　ｔｌｉｌｎｏｓｕｔｅｅｉｔｔｎｅｅｔｎｎａｉｔ　ｉｏｏ　ｍｌｇｎ　ｍｕａｉ　ｄｔｃｉ　ｉｐｔｎｓｗｔ　ｓｎｏｉｕａｈａｉ　ｊＳｅｎ　ｈｅｓｒｅｒｆｅｐｇＯｎＳｈｏｇ　ａｏｅ　ｄａｎｓｉｃｃ＆ｒｙ：ａｎｗａｐｏｃ　ｆｒｅｏｎｒｔｒｕｈ　ｎｖｌｉｇｏｔ　ｍｉｏＰａ　ｅ　ｐｒａｈｏ　ｎｗｂｒｃｅｉ　ｏｏ—ｐ］ｅｉｒｓ０６　：８—９４ｒｎｌＪａｉ１　ｓｅｎｇｆｌｗｕ［．Ｐｄｔｃ，２０，１８９５９．５ｊ　ｃａ　Ｑ，Ｇｏ，ｅｆＣｎｒｃｉ　ｏ　ａｕｉｘ［】Ｌ，Ｐｎｕ　ｙｔ．ｏｓｕｔｎｆ　ｍｌｌ　ａｌｏｔｅｐｌｅｅｉ　ＰＥｂｓｕｉｒａｒｙＡＰＡｎｓｐｌｉ　ｔｌ　ｓｆｅｃｄｖ　ａ　ｉ　ｉｏａｌｐｃｉＣ－ａｅ　ｎｅｓｌａｒ（ＳＵ）ａｄｔａｐｃｔｎｏａｅｒｇｌｓｃｅｎＪｕａｕａｉ，２０，２：５６　．ｉｏ　ｒｎｇ］　ｏ　１ｈａｎ　ｓｓｅｉ［．ＨｍｎＭｔｔｎ０８９０—５４６ｏｐｉ，Ｈｒ　，ｅａｔｖＡ，ｔ．ｅｅｐｓｎａｅｙｅ　ａ　ｅｅｉ［］Ｐｍｅ　ｃｕｌＢＢｆｎｓａ／ｅ１Ｇｎｘｒｓｏｒｆｅ　ｔｅｕｅｒａ　Ｃｒｉ　ｔｅｎｅｌ　ｏ　ｍ　ｏ　ａ　ｏ　ｈａｎ［】ｐｏｉｆｈｏｓ　ｏｇｎｆｏｔｔｈ　ｏｓｔｆｅＭｇＪ　ｎｍｃｓ０４．８１００１Ｇｅｏｉ，２００－　１ｊ：０１７ｅｅＷ，Ｓｉｋ，ＭｒｓＡ，ｅｌＩｎｆａｉ　ｏｓ［】Ｂｉ］Ｋｈａｉｒ　Ｔｉｏｒ　Ｋ　ａｔ，ｄｔｉｔｎｆｅｉｃｏｎｕ　ｔａｓｒｔ　ｆｏ　ａｏｓ　ｕ－ｅｔ，ｕｔａｔｄｎｎａ　ｃＮｑｐｌｎｎｕｉｅｒｎｃｉｓｒｍ　ｍｕｅｆｌｌｇｈｓｂｒｃｅ　ｉｅ　ｅｒＤＡｉａｙＪｅｏｉ，２０，８：０　　３ｂ】ｃ　２０ｌｒｒ［．Ｇｎｍｓ０４５１Ｉ—１２．　　［４ｈＹＧｎ　Ｗ，ＫｎｋＡｅ１ｏｅｏｅｓｍｌｉ１］Ｃｏ，ｏｇＴｃａｉｉ，ｔ．Ｎｉ　ｖｒｉｕｔｎ　ａｓｔａｏｎｃｓｍｅｉｅａｌｇｎ　ｎｈｒｔｃｃｅ［ｄａ　ｙｅ　ｅｌ］ｒｎｇｓｏＢａｉ　　ｉｉｕｅｉｍｄｔｅｒ　ｅｓｉｔ　ａ　ｏｈａＪＢａ　ｅＭｌｒｎｇｅ，２０ｓ３　：　－　０４，１０１４１５４８．１】ｏａ　Ｍｌｕｎ　Ｌ　ｈ　Ｙｅ　ａ．ｉｅｅｉ　ｄｐｙｆｎａｓａ［５Ｌｍｘ，Ｈａｇ，Ｃｏ　ｔ１Ｄｆｒｔｌｉｌｎ　ｅｅｒｓ　ｅａｉ　ｕｉｒｐｓｃｙｄ．ｅｒｓ００　ａａ　ｔｎｔｙａｉｔ　ｇａｄｇｎｒｙ０ｘｍｅａｄｏ　ｌｔｉ［】Ｈａｅ，２０，４７２—０】．９５５２．１】Ａｅ，Ｋｔｇｉ，Ｓｉ－ｉｍｎｏ　　［６ｂＳａａｉＴａｏＨａｉｔＡ，ｅａ．Ｉｎｆａｉｒ　ｔｓａ　ｅｉｃｏｔ１ｄｔｉｔｎｏ　ＣＭｓａａｄａｅｅｐｎｉｅｏ　ｎｎｙｄｏ　ｅｆｅｓｔｒｕｈｆＢＹ　ａ　　ｃｎｉｔ　ｒｓｏｓｌｄｂ　ｆｒｏｓｎｒｍｃＪ　ｄａｎｓ．ｈｏｇＤＡｍｃａｒ　ｎｌｂｏｕａ　ｏｈａ　ｎ　ｅｔｕｒｔｓｅＪ．Ａｒａｙ　ｅｉａｓ［ｃＮ　ｉｏｒｙａａｓ　ｆｈｍｎｃｃｌｒａｄｖｓｂｌ　ｉｕｓ］ｍＪｕ　ｎｔ２０５７７一８　ＨｍＧｅｅ，０２：ｊ２１］Ａ＆ｕ　［７ｓｔｒＫ，ＡｅＳＦｋｏａ，ｅ　ｌＭｔｔｎｎｌｉｏ＆ｂ　，ｕｕｋ　Ｈｔａａｏｙｓ　ｕｉ　ａａｓｆＯｇ　ｅｅｉｌｇｙｘｒｓｅ　ｉｈ　ｏｈａ　ｅｏ　ＣＬＡ３，ａｇｎ　ｈｈ　ｅｐｅｓｄｎｔｅｃｃｌ　ｉｈａｉ　ｆＳ　ｎｎｅｒｇＯＳｐｔｎ［．ＡｒＮｓｓＬｒｎ，２０，３：１－１７ａｉｔＪｅｓ］ｕｓａｕａｙｘ０５２１５１ｉ　　　［８ｈｚ　，Ｃｅ　　ＳｎＪｅａ．Ｃｎｅｉ　６ａｄ０ｒ１］ＡｍｄＳｈｎＳｕ　，ｔ１ｏｎｘｓ２　ｎ　ａｅ　　ｎ　３　ｏｓｂｄｔｏｍｇｐｕｃｏｓｎｅｏｈａｏ　ｉ［】ｆｈｍ　ａｅｅ　ｉ　　ｔｅｅｏｃｓｍｌ　ｏｆｒ　ａｊｎｔｎｉｈｃｃｌ　ｆｍｃＪ．Ｂｃｅｉｙ　ｇｓｏｍｕｐ００３２６Ｂｏｈｓｅ　Ｃｍｎ，２０３，５７：６　５８．１】［９Ｌ∈Ｖｅｑｅ　ａｌｒ　Ｓｉｏａｄ　Ｌ　　ｕ　Ｍ，Ｍ　ｎ，Ｊｎｒ，ｅ１Ｗｈｌ　ａｔ．ｅｏｉｏｈｎｒ　ｅｏ　ｃｅｎｎ　ｎａ　ｔｒａｌｎｅｉｄｏ　ｙｄｏｃｙｔｍｔｃｏｄｉｌｇｎｍｅｓｒｅｉｇｉｍａｅｎｌ　ｉｈｒｅ　ｎｎｓｎｒｍｉ　ｅｒｎｍｐｉｎ　ｕｉ　ａｇｒｎｈａｉ　ｉａｍｅｔｓｇ　ｍｃｏｔａ　ｒｓｑｅｃｎ　ｍｔｃｏｄｉｌＤＮｒｉ＆ｒｙｅｅｕｎｉｇｉｏｈｎｒａＡｃｉＪＢｒＪＨｍＧｎｔ０７　：１５　５．ｈ［ｐ］ｕ　ｕ　ｅｅ，２０，１１４—１　５　５　１［ＯｒｍｒＦ，ＫｂｒｇＷＪ　　　ｅａ．Ｄｖｌｍｎｏ２】Ｃｅｅ　Ｐｉｅｉ　，ＫｎＩＭ，ｔ１ｅｅｐｅｔｆｓｍｌｎｍ　ｏ　　ｇｎｔｐｇｉｏｒ　ｏｓ　ｓｎｒｍ［．　ｅ　ｅｅ，０７ｎｃ＆ａ　ｅＪａｅｏｙｉ　ｍｒｔｙｆｒＵｈｒｙｄｏｅ】ＪＭｄＧｎｔ２０，４１－　５６４：　３１０．［１ｉ　，ＫＰｒＭ，Ｋｒ　ｅａ．Ｇｎｅｐｓｏａａｓ２】ＡｒＲ　ｒｉｋｉｅｓ　　ｅｉ　ｙｓａｉＡ，ｔ１ｅｅｘｒｓｎｎｌｉｆａａ　一ｉ　ｙｕｉ　ＤＡｍｒａｒ　ｅｎｌｙＪｉ　ｃｅｎｃａｃｏ］ｆｏＧｔ６／ｍｃｂ　ｓｇｃＮ　ｉｏｒｙｔｈｏｇ［．ＬｅＳｉ，０５．７２５—２５８．２０６：５９６２］Ｊｂａ，ｅｅＡ，Ｓｇ　Ｒｅ１Ｍｃｐａｅｎａｉ　Ｓｋ［２ａｂＶＯｌｉｈ，ｔ．ａｒｈｇ　ｉｓｎｎ　ａｏｖｏｃｎｒｕｅ　ｔ　ｄｇｎｒｔｎｆｔｉａｃｌｉ＿ｅｄｅ　ｓｎｒｍ　ｍｕｅｏｔｉｔｓ０ｅｅｅａｉ　ｏ　ｓｒ　ｖｓｕｒｎｂｏａａｓ　ＰｎｒｄｙｄｏｅｏｓｏｅＪ．ＢＣＭｄ０６：７［　ｍｄｌ］Ｍ　ｅ，２０，４３．７３中国听力语言康复科学杂志总第３期　３

文章来源：《微电子学与计算机》 网址: http://www.wdzxyjsjzz.cn/qikandaodu/2020/1104/425.html